Elektrofores: vad det är, vad det är till för och hur det görs

Elektrofores är en laboratorieteknik som utförs i syfte att separera molekyler enligt deras storlek och elektriska laddning så att diagnos av sjukdomar kan göras, proteinuttryck kan verifieras eller mikroorganismer kan identifieras.

Elektrofores är ett enkelt och billigt förfarande som används i laboratorierutiner och i forskningsprojekt. Enligt syftet med elektrofores kan det vara nödvändigt att utföra andra tester och undersökningar för att till exempel få en diagnos.

Vad är det för

Elektrofores kan utföras för flera ändamål, både i forskningsprojekt och vid diagnos, eftersom det är en enkel och billig teknik. Således kan elektrofores utföras för att:

• Identifiera virus, svampar, bakterier och parasiter, med denna applikation vanligare i forskningsprojekt;
• Faderskapstest;
• Kontrollera uttrycket av proteiner;
• Identifiera mutationer, till exempel användbara vid diagnos av leukemier;
• Analysera typerna av cirkulerande hemoglobin, vara användbara vid diagnos av sigdcellanemi;
• Bedöm mängden proteiner som finns i blodet.

Enligt syftet med elektrofores kan det vara nödvändigt att utföra andra kompletterande tester för att läkaren ska kunna slutföra diagnosen.

Hur det görs

För att göra elektroforesen är det nödvändigt att gelén, som kan vara polyakrylamid eller agaros beroende på syftet, elektroforesbuffert och kärl, molekylviktsmarkör och ett fluorescerande färgämne, förutom en UV- eller LED-ljusutrustning, även känd som en transilluminator.

Efter beredning av gelén måste ett specifikt föremål placeras för att göra brunnarna i gelén, populärt kallad kammen, och låta gelén stelna. När gelén är klar, applicera bara ämnena på brunnarna. För detta måste en molekylviktsmarkör placeras i en av brunnarna, en positiv kontroll, som är ämnet som är känt vad det är, en negativ kontroll som garanterar reaktionens giltighet och de prover som ska analyseras. Alla prover måste blandas med ett fluorescerande färgämne, eftersom det på detta sätt är möjligt att visualisera banden på transilluminatorn.

Gelén med proverna måste placeras i elektroforesbehållaren, som innehåller den specifika buffertlösningen, och sedan slås enheten på så att det finns elektrisk ström och därmed potentialskillnad, vilket är viktigt för separationen av partiklarna enligt till deras belastning och storlek. Den elektroforetiska körtiden varierar beroende på syftet med proceduren och kan pågå i upp till 1 timme.

Efter den bestämda tiden är det möjligt att se resultatet av den elektroforetiska körningen genom transilluminatorn. När gelén placeras under UV- eller LED-ljus är det möjligt att visualisera bandmönstret: ju större molekyl, desto mindre migrerar den, närmar sig brunnen, medan ju lättare molekylen är, desto större är migrationspotentialen.

För att reaktionen ska kunna valideras är det nödvändigt att banden för den positiva kontrollen visualiseras och att ingenting i den negativa kontrollen visualiseras, annars är det en indikation på att det var kontaminering, och hela processen måste upprepas.

Typer av elektrofores

Elektrofores kan utföras för olika ändamål och enligt dess syfte kan flera typer av gel användas, den vanligaste är polyakrylamid och agaros.

Elektrofores för att identifiera mikroorganismer är vanligare att utföras i forskningslaboratorier, men för diagnostiska ändamål kan elektrofores användas för att identifiera hematologiska sjukdomar och sjukdomar som utvecklas med ökningen i mängden proteiner, som är de viktigaste typerna av elektrofores:

1. Hemoglobinelektrofores

Hemoglobinelektrofores är en laboratorieteknik som utförs för att identifiera de olika typerna av hemoglobin som cirkulerar i blodet, vilket gör det möjligt att identifiera förekomsten av sjukdomar relaterade till hemoglobinsyntes. Typen av hemoglobin identifieras med hjälp av elektrofores vid ett specifikt pH, helst mellan 8,0 och 9,0, med ett bandmönster som verifieras som kan jämföras med det normala mönstret, vilket möjliggör identifiering av närvaron av onormala hemoglobiner.

Vad det görs för: Hemoglobinelektrofores görs för att undersöka och diagnostisera sjukdomar relaterade till hemoglobinsyntes, såsom sigdcellanemi och hemoglobin C-sjukdom, förutom att de är användbara för att differentiera talassemi. Lär dig hur man tolkar hemoglobinelektrofores.

2. Proteinelektrofores

Proteinelektrofores är en undersökning som läkaren begär för att bedöma mängden proteiner som cirkulerar i blodet och därmed identifiera sjukdomar. Detta test görs från ett blodprov, som centrifugeras för att erhålla plasma, den del av blodet som bland annat utgörs av proteiner.

Efter elektrofores kan ett mönster av band visualiseras och därefter ett diagram där mängden av varje fraktion av proteiner anges, vilket är grundläggande för diagnosen.

Vad det görs för: Proteinelektrofores gör det möjligt för läkaren att undersöka förekomsten av multipelt myelom, uttorkning, cirros, inflammation, leversjukdom, pankreatit, lupus och högt blodtryck enligt bandmönstret och grafen som presenteras i undersökningsrapporten.

Förstå hur det görs och hur man förstår resultatet av proteinelektrofores.

Var den här informationen till hjälp?

Ja Nej

Din åsikt är viktig! Skriv här hur vi kan förbättra vår text:

Några frågor? Klicka här för att besvaras.

E-post där du vill få ett svar:

Kontrollera bekräftelsemeddelandet vi skickade till dig.

Ditt namn:

Anledning för besök:

--- Välj din anledning --- Sjukdom Lev bättre Hjälp en annan person Få kunskap

Är du vårdpersonal?

NejLäkareLäkemedelSjuksköterskaNäringläkareBiomedicinFysioterapeutSkönhetsvårdAndra

Bibliografi

• ENCYCLOPEDIA BIOSPHERE, VETANDE VETENSKAPLIGT CENTRUM. Elektrofores: begrepp och tillämpningar. 2015. Finns på :. Åtkomst den 24 september 2019
• KASVI. Vad är elektrofores och varför är det viktigt?. Tillgänglig i: . Åtkomst den 24 september 2019